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本制品是一款高效、快速的反转录试剂盒。经过反复优化，具有稳定性高、重复性好的特点，同时灵敏度高，与模板的亲和力强，适用于少量模板以及低拷贝基因的反转录反应。本品使用升级款逆转录酶，可耐受高达60℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的反转录。反转录产物cDNA可直接用于PCR或Real-Time qPCR，与2×SYBR Green qPCR预混液配合使用即可进行高性能的基因表达分析。

本试剂盒含有gDNA digester和4×Super RT Mix。gDNA digester可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染，保证后续结果更加可靠。4×Super RT Mix含有反转录反应所需的所有组分(高性能反转录酶，RNase抑制剂，Oligo dT引物，随机引物，RT Buffer,dNTPs)，只需加入RNA模板和RNase-free H2O即可快速高效完成反转录反应，并同时有终止gDNA digester的作用，保证cDNA的完整性。

• 5×gDNA digester Mix和4×Super RT Mix含有高浓度的甘油，使用前请短暂离心收集到管底部，并用移液枪轻轻吸打充分混匀后，准确吸取。
  
• 建议RNA模板溶解于水中。
  
• 反应液的配制，请在冰上操作完成。
  
• RNA相关操作等请使用全新RNase-free枪头、RNase-free离心管等实验耗材。建议RNA实验使用的器具、试剂和无菌水等专用，避免RNase污染。
  
• 高质量、完整的RNA对于获得高质量的cDNA至关重要，为保证反转录成功，请使用高质量的RNA模板。
  
• 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• gDNA消化处理
  在RNase-free PCR管中，按下列组分配制反应液，反应液配制操作请在冰上进行。用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 mins。
  

  成分	用量
  5×gDNA digester Mix	3μL
  Total RNA/mRNA	50pg～5μg/50pg～500ng
  RNase-Free H2O	至15μL

• 反转录反应体系
  按下表向步骤1的反应管中直接加入4×Super RT Mix，用移液器轻轻吹打混匀。
  

  成分	用量
  步骤1的反应液	15μL
  4×Super RT Mix	5μL

  • 4×Super RT Mix中含有gDNA digester抑制剂。
• 反转录程序设置
  将步骤2配制的反应体系混合均匀后，置于PCR仪中进行反应，具体程序如下：
  

  温度	时间
  25℃	5 mins
  55℃	15 mins
  85℃	2 mins

  • 反转录温度：推荐使用55℃。对于高GC含量模板或者结构复杂模板，可将反转录温度提高到60℃。
• 反应结束后，置于冰上冷却。
  
  • 合成的cDNA可立即用于后续PCR或qPCR反应，也可-20℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融。